小新今年5岁了，不要以为他是那种懵懂无知的小孩，他其实人小鬼大，喜欢漂亮的姐姐，收养了一条棉花糖一样的流浪狗——小白，还经常讲些无厘头的黄色笑话。小新的妈妈美伢是一个全职主妇，粗心而又有点神经质的她经常被小新捉弄得七窍生烟，爸爸野原亦经常被这两母子搞得晕头转向。 《蜡笔小新》的作者以一个5岁小童的眼光，40岁的成年人的心态去观察这个大千世界，看到了许多光怪陆离的景象，小新一家的幽默故事亦由此产生。
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在东京都某公寓内，住着父母双双去世的两姐妹笠原信子（小池荣子 饰）和笠原祥子（北川景子 饰）。信子在某报社工作，全力支持着刚刚走上社会不久的妹妹。这一天，信子前往东北旅行，谁知竟一去不回。倍感震惊和悲伤的祥子发现，姐姐去世的地方并非她本来要去的目的地。就在此时，姐姐的同事吉并亮一（向井理 饰）登门拜访，他也向祥子说出了自己的一些疑惑，于是两人开始接班调查。此后不久，祥子接替姐姐进入报社，在此期间，名叫町田知枝（酒井若菜 饰）自杀身亡，死后竟留给祥子关于信子之死的一些信息。越来越多的谜团驱使祥子向黑暗的深渊走去…… 本片根据日本著名推理作家松本清张的原作改编。
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